單克隆抗體的特性 單克隆抗體的問世,是生物技術領域劃時代的飛躍,促進相關學科的迅速發(fā)展與傳統(tǒng)的多克隆抗體相比有*的優(yōu)勢,但也存在一些不足之處。 (一)單克隆抗體的特性 1.高度特異性 單克隆抗體只針對一個表位,一個表位一般只有4一7個氨基酸,故單克隆抗體發(fā)生交叉反應的機會很少,即高度特異性。但這種專一性也不是的。在相似的抗原之間,其特異性具有濃度依賴性,即當抗體的濃度達到一定的程度后,其特異性可有所降低。單克隆抗體用于免疫酶染色、免疫熒光分析、放射免疫分析以及酶聯(lián)免疫吸附分析時,其反應強度不如多克隆抗體,但其特異性優(yōu)于多克隆抗體。此外,應用單克隆抗體時對抗原的保存要求也更加嚴格。例如,某些固定方法可使抗原的特定表位失去抗原性而產生陰性結果。 2.高度的均一性和可重復性 單克隆抗體是由單個細胞株產生的均一性抗體。只要長期保持雜交瘤細胞的穩(wěn)定性,不發(fā)生突變,就可以長期獲得同質的單克隆抗體,單克隆抗體僅具有單一的生物功能。 3.弱凝集反應和不呈現(xiàn)沉淀反應 單克隆抗體與抗原反應(除非抗原上有較多的同一表位)不呈現(xiàn)沉淀反應,這是因為抗單一抗原決定簇表位的單克隆抗體不易形成三維晶格結構之故。由于單克隆抗體對細胞的凝集作用較多克隆抗體弱,所以單克隆抗體的細胞毒作用也較弱。其細胞毒作用不僅取決于單克隆抗體的種類,而且取決于抗原決定簇在細胞表面的分布。兩種或兩種以上的單克隆抗體可使細胞表面的抗原表位集中,并使其細胞毒的作用加強。 4.對環(huán)境敏感性 單克隆抗體易受環(huán)境的pH、溫度和鹽類濃度的影響,使其活性降低甚至喪失,但單克隆抗體遇熱后的聚合作用很低。已證明56~C、5min可使單克隆抗體失活,小鼠血清可能有一定的保護作用,兩種單克隆抗體的混合物也可使其耐熱性加強??傊?,單克隆抗體越純對溫度越敏感,而雜蛋白及其他抗體分子可使單克隆抗體的耐熱性增強。單克隆抗體受pH的影響較多克隆抗體明顯,其*的pH為6~8,而且抗體越純對pH越敏感。低濃度的NaCl對單克隆抗體可能有一定的保護作用。 (二)單克隆抗體的優(yōu)點與局限性 單克隆抗體和多克隆抗體各有其優(yōu)點和局限性,只有對它們有全面的了解,才能根據不同應用領域的要求,正確地選擇和應用。 1.單克隆抗體的優(yōu)點 (1)雜交瘤可以在體外“*”地存活并傳代,只要不發(fā)生細胞株的基因突變,就可以不斷地生產高特異性、高均一性的抗體。 (2)可以用相對不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。 (3)由于可能得到“無*”的均一性抗體,所以適用于以標記抗體為特點的免疫學分析方法,如IRMA和ELISA等。 (4)由于單克隆 抗體的高特異性和單一生物學功能,可用于體內的放射免疫顯像和免疫導向治療。 2.單克隆抗體的局限性 (1)單克隆抗體固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應用范圍。由于單克隆抗體不能進行沉淀和凝集反應,所以很多檢測方法不能用單克隆抗體完成。 (2)單克隆抗體的反應強度不如多克隆抗體。 (3)制備技術復雜,而且費時費工,所以單克隆抗體的價格也較高。 |