欧美性猛交xxxx乱大交,两个黑人大战嫩白金发美女,国产大屁股视频免费区,男男暴菊GAY无套网站

主營:ELISA試劑盒,化學(xué)試劑,生物醫(yī)學(xué)試劑,生命科學(xué)科研產(chǎn)品.
 
酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒[ELISA Kit]
生物醫(yī)學(xué)試劑
化學(xué)試劑
分子生物學(xué)試劑
抗體庫
蛋白
細(xì)胞生物學(xué)
Amresco產(chǎn)品
Wako(和光純藥)標(biāo)準(zhǔn)品
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備
實(shí)驗(yàn)室耗材
 
 
ELISA的質(zhì)量控制
點(diǎn)擊次數(shù):1014 更新時(shí)間:2010-07-10
 

         從1949年美國College of American Pathologists(簡稱CAP)首先開始研究臨床實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制(簡稱質(zhì)控)問題,美國學(xué)者Levery和Jenn ing于1950年發(fā)表*篇關(guān)于使用質(zhì)控圖的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉序幕。


    到70年代,實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制進(jìn)入一個(gè)新的階段--全面質(zhì)量管理,推行Good Laboratory Parctice(簡稱GLP)。進(jìn)入80年代末期,GLP的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)生了,發(fā)展到"認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室"管理階段。


    全面質(zhì)量管理的宗旨在于預(yù)防差錯(cuò)的產(chǎn)生。質(zhì)控圖的統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控的目的是檢出差錯(cuò)。統(tǒng)計(jì)學(xué)的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控是全面質(zhì)量管理中的一個(gè)重 要環(huán)節(jié)。


    本章節(jié)主要介紹免疫學(xué)檢驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)控方法。因?yàn)镋LISA是目前臨床上zui常用的一種免疫學(xué)檢驗(yàn)方法,就以ELISA檢驗(yàn)為例,介紹一下有關(guān)問題。


    衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心免疫質(zhì)控室從 1988年開始在全國范圍內(nèi)開展乙肝標(biāo)志物檢驗(yàn)的質(zhì)量評價(jià)活動,一直采用這一套質(zhì)量評價(jià)方法,并在實(shí)踐中不斷實(shí)踐、提高和完善, 希望能找出一條適合中國國情的,行之有效的質(zhì)量管理的道路。


5.1 基本概念


5.1.1 質(zhì)量控制(Quaility Control,Q.C)


    質(zhì)量控制是監(jiān)視全過程,排除誤差,防止變化,維持標(biāo)準(zhǔn)化現(xiàn)狀的一個(gè)管理過程。這一過程是通過一個(gè)反饋環(huán)路進(jìn)行的。
  1)確定控制的對象;
  2)規(guī)定控制對象的標(biāo)準(zhǔn)(預(yù)期值);
  3)制定或選擇控制方法和手段;
  3)測量實(shí)際數(shù)據(jù);
  4)比較或較對實(shí)際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異,并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)
    定誤差范圍,報(bào)警系發(fā)出信號,反饋通道中斷。
  5)采取行動,解決差異?;謴?fù)原狀(原標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))的手段發(fā)揮作用。


    質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進(jìn)行。質(zhì)控圖是把某一檢驗(yàn)的性能數(shù)據(jù)與所計(jì)算出來的預(yù)期的 "控制限"進(jìn)行比較的圖。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進(jìn)行時(shí),按時(shí)間順序而抽選出來的,其目的是檢測檢驗(yàn)過程中變異的"可追查" 性原因。"可追逆"性的誤差原因,是指除去隨機(jī)誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統(tǒng)計(jì)計(jì)算出來的,在后我們將詳細(xì)介紹(見5 .3.室內(nèi)質(zhì)控程序)。


5.1.2 誤差


    實(shí)驗(yàn)誤差分為三種:系統(tǒng)誤差、隨機(jī)誤差和過失誤差。


    系統(tǒng)誤差是指一系列測定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規(guī)律性,可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn),是可以通過質(zhì)控預(yù)防和 校正的。


    隨機(jī)誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗(yàn)工作中隨機(jī)誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。


    過失誤差是人為的責(zé)任誤差。通過加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理和開展質(zhì)量控制工作是可以避免的。


5.1.3 正態(tài)分布及標(biāo)準(zhǔn)差


    ELISA試驗(yàn)中,檢驗(yàn)同一樣本達(dá)20次以上時(shí),就會發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測定結(jié)果的吸光值)分布在均值兩側(cè),大部分集中在均值附近 。如果以測定值為橫坐標(biāo),以出現(xiàn)的頻率為縱坐標(biāo)作圖,就可繪出一個(gè)呈鐘形的曲線圖。如圖5-1,鐘頂處為均值,其他值以均值為中 心對稱分布,這就是正態(tài)分布。


    正態(tài)曲線以下的面積稱概率,常用樣本的均數(shù)(X)和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)來表示,其計(jì)算方法如下:

  均值、標(biāo)準(zhǔn)差和概率的關(guān)系如下:
  X±1SD,概率0.68    X±2SD,概率0.95    X±3SD,概率0.99


    換言之,當(dāng) ELSIA檢測同一樣本達(dá)一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2 SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合 格時(shí),將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。


5.1.4 真值


    用確切的、的決定性方法測得的值,稱為真值。真值一般是測不到的。通過可靠的決定性方法測出的值,稱為靶值,通常用靶值來 表示真值的大小。


5.1.5 準(zhǔn)確度(accuracy)


    是指測定結(jié)果與真值(或靶值)接近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表示,往往用不準(zhǔn)確度來衡量。測定結(jié)果與靶值的偏離程度稱為偏差,它 表示該項(xiàng)檢驗(yàn)的不準(zhǔn)確度。
  偏差=檢驗(yàn)的均值-真值(或靶值)
  相對偏差=偏差真值÷(或靶值)×100%


5.1.6 精密度(Precision)

 
    是指對同一樣本重復(fù)測定時(shí),每次測定結(jié)果與平均值的接近程度,即重復(fù)測定值之間的符合程度。


5.1.7 標(biāo)準(zhǔn)品


1、標(biāo)準(zhǔn)品由WHO或相應(yīng)組織標(biāo)定的,用肯定的、*的、準(zhǔn)確的物理或化學(xué)方法測定的定值材料。


2、生物學(xué)活性標(biāo)準(zhǔn)品根據(jù)生物學(xué)反應(yīng)由WHO或相應(yīng)組織標(biāo)定的活性單位的材料。


3、參考標(biāo)準(zhǔn)血清國家標(biāo)準(zhǔn)化組織根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的法定材料??捎糜阼b定儀器和鑒定方法準(zhǔn)確性。


5.1.8 臨床決定性水平(clinical decision leuel)


    當(dāng)某個(gè)被測物的濃度達(dá)到某一水平時(shí),臨床醫(yī)師必須采用醫(yī)療措施。被測物的這濃度稱為臨床決定性水平。


5.2質(zhì)量控制血清


    質(zhì)控血清是已有靶值的血清,在每次的常規(guī)檢驗(yàn)中加入一份或數(shù)份,通過所得結(jié)果來了解本次檢驗(yàn)的情況。質(zhì)控血清檢驗(yàn)的結(jié)果如能控制 其誤差在一定范圍內(nèi),就說明該檢驗(yàn)沒有發(fā)生不允許的誤差。如果出現(xiàn)超過允許誤差范圍的異常結(jié)果,提示該檢驗(yàn)不合格,應(yīng)尋找原因, 糾正后,重檢待測標(biāo)本。因此質(zhì)控血清在質(zhì)控工作中起重要作用。


5.2.1 質(zhì)控血清的使用


    衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清,可以在 -20℃保持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化使用時(shí),應(yīng)先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復(fù)冰融或自行分裝。開展某項(xiàng)檢驗(yàn) 的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,一般按3-6個(gè)月用量準(zhǔn)備。自制的不定值質(zhì)控血清,在一批質(zhì)控血清將用完之前,需準(zhǔn)備下一批質(zhì)控 血清。質(zhì)控血清要求性能穩(wěn)定,較長期內(nèi)效價(jià)不變,其理化性質(zhì)應(yīng)與病人樣本相近,這樣才能有效地起到監(jiān)測作用。


5.2.2 臨界值質(zhì)控血清


    質(zhì)控制血清分定值和未定值兩種。如只用一份質(zhì)控血清定值,一般定在正常值與異常值交界點(diǎn)上,定性測定時(shí)處于弱陽性水平,稱為臨界 值。乙肝標(biāo)志物臨界值的制定,應(yīng)按臨床要求,為臨床提供統(tǒng)一的判斷弱陽性的標(biāo)準(zhǔn)。臨界值質(zhì)控血清可以作為試劑盒中的陽性對照品和 陰性對照品以外的第三個(gè)對照品,它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平,確保弱陽性反應(yīng)的標(biāo)本不漏檢。


5.2.3 質(zhì)控血清的制備


    每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的條件,選用臨床中心提供的質(zhì)控血清,或按以下方法自己制備
本室使用的質(zhì)控血清(以乙肝質(zhì)控血清為例)。


1) 收集新鮮的無溶血、無黃疸、無細(xì)菌污染的陽性血清。
2) 56℃加熱10小時(shí)來活。
3) 離心或過濾除去沉淀。
4) 用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將收集的血清稀釋至所需的濃度。如能用正常的人血清稀釋更好,因其成份更接近于檢測標(biāo)本。
5) 抽濾除菌。按一次使用的量分裝小安瓿,封口,20℃保存?zhèn)溆谩2豢煞磸?fù)凍融。
    被檢物要求檢出的水平常被認(rèn)為是質(zhì)控血清應(yīng)選擇的水平。如果該試驗(yàn)還有其它要求,則應(yīng)加所要求濃度的質(zhì)控物。
6) 標(biāo)定含量。20-30次測定結(jié)果刪除>±2SD數(shù)據(jù)的均值作為靶值,并與已知定值血清對比測定。


5.3 室內(nèi)質(zhì)量控制程序


    臨床檢驗(yàn)的檢測結(jié)果,每次或每天之間不可能*。決定允許的誤差范圍,以臨床上不造成誤診與漏診為準(zhǔn),通過以下步驟來確定質(zhì) 控范圍。
1) *條件下的測定誤差。
2) 已知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差。
3) 未知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差。
4) 臨床應(yīng)用的要求。對任何一個(gè)試驗(yàn)都應(yīng)確定一個(gè)允許的誤差范圍,前題是滿足臨床要求。如允許誤差定得過小,在臨床上不存在任何意義 ,但為了符合該規(guī)定卻要花費(fèi)很大人力、物力和時(shí)間。相反,如果將允許誤差定得過大,將使監(jiān)測系統(tǒng)察覺不到臨床上要求檢出的誤差, 失去質(zhì)控的意義。


5.3.1 *條件下已知值質(zhì)控血清變異(optimal conditions variance,簡稱OCV)的測定


    在本實(shí)驗(yàn)室*條件下(包括操作者、試劑、儀器等)檢測質(zhì)控血清20-30次,測得結(jié)果計(jì)算,求出該組數(shù)據(jù)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差(SD)表示該實(shí)驗(yàn)室的*工作質(zhì)量。


    現(xiàn)舉例說明HBsAg ELISA法檢測時(shí)OCV的測定。使用的質(zhì)控制血清為臨界血清,HBsAg濃度為5ng/ml。在該實(shí)驗(yàn)室中選擇素質(zhì)、操作 zui熟練的技術(shù)員進(jìn)行認(rèn)真地專門測定,選用*的試劑盒,檢測之前,將恒箱、加樣器等認(rèn)真校正、調(diào)校正、調(diào)試,使用新的加樣吸頭等 ,即在*、的條件下進(jìn)行檢測。除質(zhì)控血清外同時(shí)測定陰性對照品和陽性對照品。并作雙份測定,得出2個(gè)吸光值(A值),求 出X。連續(xù)作20次,求出20個(gè)X,即X1……X20。從這20個(gè)數(shù)據(jù)中,求出OCV的X和SD。


5.3.2常規(guī)條件下已知值質(zhì)控血清變異(routine conditions variance-known value,簡稱RCVK)的測定。


    做常規(guī)檢驗(yàn)的技術(shù)人員,在常規(guī)檢驗(yàn)的條件下,將質(zhì)控血清放在常規(guī)檢測樣本中,進(jìn)行 20次檢驗(yàn),結(jié)果計(jì)算同OCV法。一般認(rèn)為RCV的SD在OCV的SD兩倍范圍內(nèi)可以接受。若太大應(yīng)該查找原因,使其向OCV的 SD值靠近。在改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室條件后(例如較正加樣器,糾正洗板操作,調(diào)正溫育溫度等),重新進(jìn)行RCVK的測定。如果RCVK的S D值更小,說明OCV不是*條件下測定的,應(yīng)重新再測OCV。常規(guī)條件下,RCVK肯定要比OCV大。通過質(zhì)控控制各項(xiàng)條件, 使RCVK的數(shù)據(jù)盡可能接近OCV值。RCVK的數(shù)據(jù)反映該實(shí)驗(yàn)室日常工作的質(zhì)量,用于作質(zhì)控圖,對室內(nèi)檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行控制,每 日檢驗(yàn)的結(jié)果,報(bào)告能否發(fā)出。


5.3.3常規(guī)條件下,未知值質(zhì)控血清變異(routine conditions variancl-unknown value 簡稱RCVU)的測定


有時(shí)為了避免主觀性,再作RCVU測定。


    測定步驟同 RCVK,但檢測的操作者不知質(zhì)控血清的定值,或在操作者不知哪份是質(zhì)控血汪清的條件下進(jìn)行常規(guī)檢驗(yàn),以排除操作者的主觀性。在 此不再舉例說明。


5.3.4質(zhì)控圖


    通過以上三步驟,可以開始作室內(nèi)質(zhì)控圖,根據(jù) RCVK的和SD作質(zhì)控框圖。利用質(zhì)控圖可以對每次檢驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行監(jiān)測,當(dāng)沒有更換另一批號試劑盒和另一批號質(zhì)控血清時(shí),該質(zhì)控 圖可以連續(xù)作下去。


    質(zhì)控血清的S/CO值低于-2SD的范圍,屬"告警",應(yīng)尋找原因并在質(zhì)控圖上記錄查出的原因。


    ELISA試驗(yàn)中,各種檢驗(yàn)項(xiàng)目的誤差允許范圍均有待在實(shí)踐中得出結(jié)論,以上只是舉例說明質(zhì)控方法,不是定論。2SD是一般* 的允許誤差限度。每批測定放一份質(zhì)控血清時(shí),一次超過2SD應(yīng)作為"告警",二次超出2SD為"失控"。當(dāng)質(zhì)控過程中,出現(xiàn)失控 時(shí),出現(xiàn)失控時(shí),應(yīng)查找原因,通常是試劑盒或質(zhì)控血清失效造成。更換試劑盒或更換質(zhì)控血清,找出原因糾正后重新檢驗(yàn)。如果檢驗(yàn)結(jié) 果仍達(dá)不到要求或找不到原因時(shí),應(yīng)重復(fù)進(jìn)行OCV的檢驗(yàn)。如果OCV檢驗(yàn)的結(jié)果仍是好的,說明常規(guī)操作出現(xiàn)問題。一般認(rèn)為:①一 次超出3SD;②連續(xù)二次超出2SD;③3-5次連續(xù)處于一側(cè)的2SD之內(nèi);④5~7次連續(xù)偏向橫軸的一側(cè),均為失控。第③、④ 種情況,單獨(dú)依靠記錄往往是不易察覺的,但在質(zhì)控圖上可以清晰地發(fā)現(xiàn)這種失控。


5.3.5統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算方法--"即刻性"質(zhì)控


    以上介紹的質(zhì)控方法基本上與臨床化學(xué)測定的質(zhì)控方法相同,但 ELISA有其特殊性,zui合適的質(zhì)控方法尚待研究建立。有些實(shí)驗(yàn)室不是每天進(jìn)行ELISA項(xiàng)目的檢驗(yàn),而ELSIA試劑盒效期短 ,用一批號試劑盒連續(xù)常規(guī)測20次,難度較大。采用"即刻法"質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法,只需連續(xù)測3次,即可對第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。" 即刻法"的建立具體計(jì)算方法如下:
1)先將測定值從小到大排列
2)計(jì)算X和SD。
3)計(jì)算SDI上限和SDI下限值。
4)將SDI上限、SDI下限值與SDI值中的數(shù)字比較。


    當(dāng) SDI上限值和SDI下限值<n2SD時(shí),表示處于控制范圍內(nèi),可以繼續(xù)往下測定,繼續(xù)重復(fù)以上各項(xiàng)計(jì)算;當(dāng)SDI上限和SDI 下限有一值處于n2SD和n2SD值之間時(shí),說明該值在2SD~3SD范圍,處于"告警"狀態(tài);當(dāng)SDI上限和SDI下限有一值 >n2SD時(shí),說明該值已在3SD范圍之外,屬"失控"。數(shù)值處于"告警"和"失控"狀態(tài)應(yīng)舍去,重新測定該項(xiàng)質(zhì)控血清和病人樣 本。舍去的只是失控的這次數(shù)值,其他次測定值仍可繼續(xù)使用。


即刻性質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法,適于ELISA測定的質(zhì)控。


    當(dāng)檢測的數(shù)值超過 20次以后,不必再使用"即刻法"質(zhì)控統(tǒng)計(jì)計(jì)算,可以轉(zhuǎn)入常規(guī)的質(zhì)控圖的質(zhì)控。將前20次的數(shù)值求出的和SD作質(zhì)控框架圖,第2 1次的數(shù)值,依次點(diǎn)入即可。


5.4室間質(zhì)量評價(jià)(external quality assessment,簡稱EQA)


    室間質(zhì)量評價(jià)簡稱室間質(zhì)評,是由質(zhì)控中心采用一系列的辦法連續(xù)地、客觀地評價(jià)各實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)結(jié)果,并發(fā)現(xiàn)室內(nèi)質(zhì)控不易發(fā)現(xiàn)的不準(zhǔn) 確性,了解各實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果的差異,并幫助校正,使具有可比性。各實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)結(jié)果報(bào)到質(zhì)控中心,經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析,得出相互比較的結(jié) 果。這種評價(jià)不能控制各實(shí)驗(yàn)室每天發(fā)出的檢驗(yàn)報(bào)告,而是一種回顧性評價(jià)。室內(nèi)質(zhì)控主要監(jiān)測試驗(yàn)結(jié)果的精密度,而室間質(zhì)評主要控制 試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度,不能互相替代。參與質(zhì)評的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)先做好室內(nèi)質(zhì)控。


5.4.1室間質(zhì)評的方法


1、 發(fā)質(zhì)控物進(jìn)行調(diào)查


    這是國內(nèi)外室間質(zhì)評的常用形式。部臨檢中心對乙肝標(biāo)志物 ELISA檢驗(yàn)的室間質(zhì)評采用定期發(fā)放質(zhì)控物至各實(shí)驗(yàn)室,各實(shí)驗(yàn)室在規(guī)定的日期進(jìn)行檢驗(yàn),并將檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)至部臨檢中心。部臨檢中 心經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,將評價(jià)結(jié)果寄回各實(shí)驗(yàn)室。通過評價(jià),各實(shí)驗(yàn)室了解本室工作質(zhì)量,發(fā)現(xiàn)差距,并設(shè)法改進(jìn),以不斷提高檢驗(yàn)質(zhì)量。


    這種評價(jià)方式有一定缺點(diǎn),即各實(shí)驗(yàn)室常對質(zhì)控物特殊對待,在檢驗(yàn)時(shí)選用特殊試劑盒,選派特別的技術(shù)員進(jìn)行檢驗(yàn),有的實(shí)驗(yàn)室互相和 對結(jié)果并作修改。這就使EQA的結(jié)果不能反映該實(shí)驗(yàn)室日常工作水平。


2、 派觀察員到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試劑調(diào)查


    這種調(diào)查事先不通知,臨時(shí)派觀察員到實(shí)驗(yàn)室,采用常規(guī)方法,檢驗(yàn)規(guī)定的一組標(biāo)本,進(jìn)行評價(jià)。


    這種調(diào)查方式,容易發(fā)現(xiàn)該實(shí)驗(yàn)室存在的實(shí)際問題,可以直接給予指導(dǎo)和幫助,解決問題,提高檢驗(yàn)質(zhì)量。這種調(diào)查通常可以使用真實(shí)樣 本,避免采用質(zhì)控物的一些缺點(diǎn)。 
 

上一篇 ELISA         下一篇 ELISA基本原理
 
 
   
上海繼錦化學(xué)科技有限公司 版權(quán)所有 總訪問量:470255 地址:上海閔行區(qū)綠蓮路100弄45號 郵編:201101
電話:400-002-6926 、 021-34535391 傳真: 86-021-34535391 手機(jī):15900443528,18917067275. 聯(lián)系人:黃先生 郵箱:jijinhuaxue@sina.com
GoogleSitemap 網(wǎng)址:m.yhauhqf.cn ICP備案號:滬ICP備09038059號-1
電話
400-002-6926
021-34535391
手機(jī)
15900443528
18917067275
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息