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酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒[ELISA Kit]
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蛋白的裂解與提取方法
點(diǎn)擊次數(shù):1073 更新時間:2010-07-15

10ml 三去污裂解液配方如下:
50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0): 0.07882g
150 mmol/L NaCl: 0.08775g
0.2 g/L疊氮鈉: 0.002g
1 g/LSDS 0.01g
100 mg/L Aprotin 0.001g
10 g/L NP-40 0.1g
5 g/L去氧膽酸鈉 0.05g
100 mg/L 苯甲基磺酰氟(PMSF) 0.001g


總蛋白抽提程序:
1.PBS洗細(xì)胞3 次
2.加入裂解緩沖液(1.5x106個細(xì)胞大約加入100µL 裂解液,或100ml細(xì)胞瓶中加入100µL 裂解液),
冰上放置20min
3.收集裂解液
4.離心,12000轉(zhuǎn),2~10min
5.吸取上清,蛋白定量,分裝,保存在-80度備用

 
 
   
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