制品內(nèi)容 (250 U) |
Fast Taq DNA聚合酶(5 U/μl) | 50 μl | 2 × GT PCR Reaction Mix | 2000 μl | |
|
· 制品說明 |
|
SinoBio Fast Genotyping PCR Kit超敏基因組PCR擴增檢測試劑盒(快速型)專門為基因組及微量DNA PCR擴增檢測設(shè)計優(yōu)化,可從少量基因組模板中高效擴增出0.2kb~4kb的目的條帶,其靈敏度為普通PCR反應(yīng)的100~10,000倍。適用于基因組PCR擴增、微量模板、復(fù)雜模板等的擴增和大規(guī)?;驒z測。 針對普通Genotyping PCR循環(huán)數(shù)目多(40次循環(huán)),反應(yīng)時間較長缺陷,超敏基因組PCR擴增檢測試劑盒(快速型)采用SinoBio FastTaqDNA聚合酶,該酶是利用分子進化技術(shù)在普通Taq酶基礎(chǔ)上改造、制備的新型FastTaq DNA聚合酶,其擴增速度大幅提高,至少為普通Taq酶的4倍,因此大大縮短了基因組PCR擴增檢測所需的時間。 本產(chǎn)品包括2X反應(yīng)緩沖體系和酶2個獨立的組分,其2X Reaction Mix包含了genotyping PCR所需的全部試劑、dNTP及PCR增強劑。本產(chǎn)品使用方便快捷,使用時只需在2X Reaction Mix加入引物、模板及酶并加入去離子水稀釋至1X即可進行反應(yīng)。2X Reaction Mix提供不含染料/含染料(藍色)兩種形式供您選擇,經(jīng)測試,染料的加入不影響擴增性能。2X Reaction Mix中預(yù)混藍色染料的,在配置反應(yīng)體系時,可很方便地檢測各組分混勻情況,在PCR反應(yīng)完成后可直接電泳,節(jié)省時間。 | | |
· 用 途 |
適用于從復(fù)雜背景中擴增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突變率高于普通PCR反應(yīng),故其產(chǎn)物不推薦用于需高保真的基因克隆。Genotyping PCR所用引物需精心設(shè)計,否則會擴增出較多雜帶,(參見PCR引物設(shè)計的黃金法則)。 |
|
· 產(chǎn)品特點 |
本產(chǎn)品不同批次之間誤差很小,特別適合大規(guī)?;驒z測和微量DNA的檢測。復(fù)雜模板(如含二級結(jié)構(gòu),GC rich,和重復(fù)序列等)的擴增:(如構(gòu)建基因圖譜、測序及分子遺傳學研究等)。PCR產(chǎn)物如需克隆,純化后可直接進行T/A載體克隆。 |
|
· 質(zhì)量保證 |
使用推薦體系及PCR程序,可從100ng人基因組DNA背景中擴增檢測出1fg LacZ質(zhì)粒模板的存在。 |
|
· 使用建議 |
經(jīng)測試按右側(cè)反應(yīng)體系及PCR程序可獲得理想的擴增結(jié)果。推薦將此反應(yīng)體系及PCR程序作為條件優(yōu)化的初始反應(yīng)。 |
|
· 推薦體系及程序 |
超敏基因組PCR擴增檢測反應(yīng)體系 | 2X Reaction Mix | 10μl | 上游引物 | 0.05μM(終濃度) | 下游引物 | 0.05μM(終濃度) | 模板DNA | 1~100ng基因組DNA | FastTaq酶 | 0.25 | ddH2O | 至20μl | *反應(yīng)體系可成比例調(diào)整至50μl等體積 | 超敏基因組PCR擴增檢測PCR程序 | 93℃ | 1分鐘30秒 | 40次循環(huán) | 93℃,30秒 | | 57℃,30秒 | | (57℃適用于大多數(shù)反應(yīng)亦可在55~60℃間調(diào)整) | | 65℃,按產(chǎn)物長度15秒/1kb計算 | |